以下是AusGene胎牛血清是一種廣泛應用于細胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基補充劑,其質(zhì)量直接影響細胞生長狀態(tài)和實驗結(jié)果。以下是影響AusGene胎牛血清使用效果的主要因素:
一、血清本身的特性
1.批次差異:
不同批次的胎牛血清可能因來源胎牛的健康狀況、采集工藝、儲存條件等存在差異,導致營養(yǎng)成分、生長因子、激素水平及內(nèi)毒素含量不同。
解決方案:同一實驗或長期培養(yǎng)時,盡量選擇同一批次血清,并提前進行細胞適應性測試。
2.質(zhì)量控制指標:
內(nèi)毒素:高水平內(nèi)毒素會激活細胞炎癥反應,影響細胞活性。
血紅蛋白:高濃度游離血紅蛋白可能對細胞產(chǎn)生毒性。
微生物污染:需確保無菌,且無支原體、病毒等污染。
生長因子與營養(yǎng)物質(zhì):如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、氨基酸等濃度直接影響細胞增殖能力。
1.儲存條件:
未開封的血清應保存于-5℃~-20℃(避免反復凍融),開封后需盡快分裝并冷凍,避免多次解凍導致蛋白降解或污染。
錯誤操作:長時間室溫放置、反復凍融(每次凍融會造成血清中蛋白質(zhì)變性或溶菌*失活)。
2.分裝與解凍:
建議將大瓶血清分裝成小份,減少重復凍融次數(shù)。
解凍時需在2~8℃緩慢融化(可放置于冰箱冷藏層或低溫水浴),避免高溫加速蛋白失活。
三、AusGene胎牛血清細胞培養(yǎng)體系的影響
1.細胞類型:
不同細胞對血清的依賴性不同。例如,原代細胞、干細胞通常需要更高濃度的血清,而傳代細胞可能僅需5%~10%。
AusGene血清需根據(jù)細胞特性調(diào)整濃度,濃度過高可能抑制某些細胞的生長。
2.培養(yǎng)基配方:
血清需與基礎培養(yǎng)基和其他添加劑兼容。
注意:避免血清與某些抗生素長時間混合,可能降低血清活性。
3.培養(yǎng)環(huán)境:
pH值:血清的加入會略微改變培養(yǎng)基的pH值,需通過酸堿調(diào)節(jié)維持穩(wěn)定。
滲透壓:高濃度血清可能影響培養(yǎng)基的滲透壓,需平衡血清比例與細胞耐受性。
